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CCK8試劑盒(增強型)
產品貨號:RC0501
產品品牌:AboRo
產品分類:ELISA 試劑盒
產品規格:500次
產品價格:299

產品介紹

CCK8試劑盒(增強型)簡稱CCK8試劑盒,是一種基于WST-8(化學名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽)的廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。

CCK8工作原理:在電子耦合試劑存在的情況下,可以被線粒體內的脫氫酶還原生成高度水溶性的橙黃色的甲臜產物(formazan)。顏色的深淺與細胞的增殖成正比,與細胞毒性成反比。使用酶標儀在450nm波長處測定OD值,間接反映活細胞數量。

CCK8MTT的一種升級替代產品,和MTT或其它MTT類似產品如XTTMTS等相比有明顯的優點。首先,MTT被線粒體內的一些脫氫酶還原生成的formazan不是水溶性的,需要有特定的溶解液來溶解;而CCK8XTTMTS產生的formazan都是水溶性的,可以省去后續的溶解步驟。其次,CCK8產生的formazanXTTMTS產生的formazan更易溶解。再次,CCK8XTTMTS更加穩定,使實驗結果更加穩定。另外,CCK8MTTXTT等相比線性范圍更寬,靈敏度更高。

CCK8應用非常廣泛,如藥物篩選、細胞增殖測定、細胞毒性測定、腫瘤藥敏試驗以及生物因子的活性檢測等。


使用方法


     一、細胞活性檢測

注意:如果待測物質有氧化性或還原性的話,可在加CCK8之前更換新鮮培養基(除去培養基,并用培養基洗滌細胞兩次,然后加入新的培養基),去掉藥物影響。當然藥物影響比較小的情況下,可以不更換培養基,直接扣除培養基中加入藥物后的空白吸收即可。

1.96孔板中接種細胞懸液(100μL/孔)。將培養板放在培養箱中預培養(37,5%CO2)。

2.向每孔加入10μLCCK8溶液(注意不要在孔中生成氣泡,它們會影響OD值的讀數)。

3.將培養板在培養箱內孵育1-4h

4.用酶標儀測定在450nm處的吸光度。

5.若暫時不測定OD值,可以向每孔中加入10μL0.1MHCl溶液或者1%w/vSDS溶液,并遮蓋培養板避光保存在室溫條件下,24h內測定,吸光度不會發生變化。

二、細胞增殖-毒性檢測

1.在96孔板中配置100μL的細胞懸液。將培養板在培養箱預培養24h(37℃,5%CO2)。

2.向培養板加入1-10μL不同濃度的待測物質。

3.將培養板在培養箱孵育一段適當的時間(例如:6122448h)。

4.向每孔加入10μLCCK8溶液(注意不要再孔中生成氣泡,它們會影響OD值的讀數)。

5.將培養板在培養箱內孵育1-4h

6.用酶標儀測定在450nm處的吸光度。

7.若暫時不測定OD值,可以向每孔中加入10μL0.1MHCl溶液或者1%w/vSDS溶液,并遮蓋培養板避光保存在室溫條件下。24h內測定,吸光度不會發生變化。


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